见血青提取物止血作用的实验研究Δ

见血青提取物止血作用的实验研究Δ内容摘要：

·中药研究· 见血青提取物止血作用的实验研究Δ 赵 颖＊，胡少南，郑一敏，胥秀英（重庆理工大学药学与生物工程学院，重庆 400054） 中图分类号 R285.5 文献标志码 A DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2013.31.02 文章编号 1001-0408（2013）31-2884-03 摘 要 目的：研究见血青的止血、促凝血作用。方法：小鼠分别灌胃高、低剂量（4、2 g/kg）见血青水提取物、石油醚提取物、二氯 甲烷提取物、水醇液提取物，每天 1 次，连续 7 d 后剪尾测定止血时间（BT）；毛细管法测定凝血时间（CT）。大鼠分别灌胃高、低剂 量（4、2 g/kg）见血青水提取物、石油醚提取物、二氯甲烷提取物、水醇液提取物，每天 1 次，连续 7 d 后颈总动脉采血，测定凝血酶原 时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FLB）含量。结果：高、低剂量见血青二氯甲烷提取物 可显著缩短小鼠 BT（P＜0.05），低剂量见血青二氯甲烷提取物可显著缩短小鼠 CT 和大鼠 APTT（P＜0.05），高、低剂量见血青水提 取物与石油醚提取物、二氯甲烷提取物、水醇液提取物可显著增加大鼠 FIB 含量（P＜0.05）。结论：见血青具有较好的止血、促凝 血作用，推测其作用机制可能与收缩血管、抑制纤溶酶活性、增加 FIB 含量有关。 关键词 见血青；止血； 止血时间；凝血时间；纤维蛋白原 Study on the Hemostatic Effect of the Extracts from Liparis nervosa ZHAO Ying， HU Shao-nan， ZHEN Yi-min， XU Xiu-ying（School of Pharmacy and Bioengineering， Chongqing University of Technology，Chongqing 400054，China） ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effect of Liparis nervosa on promoting hemostasis and blood coagulation. METHODS： The mice were given high-dose and low-dose（4，2 g/kg）aqueous extract，aether petrolei extract，dichloromethane extract，water extraction and alcohol precipitation of L. nervosa intragastrically once a day for consecutive 7 days. The bleeding time（BT）was determined by shearing tail method. Clotting time（CT）was detemined by capillary tube method. The rats were given high-dose and low-dose（4，2 g/kg）aqueous extract，aether petrolei extract，dichloromethane extract，water extraction and alcohol precipitation of L. nervosa intragastrically once a day for consecutive 7 days. The blood samples were collected from carotid artery for the determination of prothrombin time（PT），activated partial thromboplastin time（APTT），thrombin time（TT）and fibrinogen（FIB）. RESULTS：High-dose and low-dose dichloromethane extract of L. nervosa could shorten BT of mice significantly（P＜0.05）；CT and the APTT values were obviously shortened by low-dose dichloromethane extract（P＜0.05），and FIB values were obviously increased by all of the extracts of L. nervosa（P＜0.05）. CONCLUSIONS：L. nervosa has an effect on promoting hemostasis and blood coagulation， and its mechanisms may be related with shrinking blood vessels，inhibiting plasmin activity and rising FIB content. KEY WORDS Liparis nervosa；Hemostatic effects；Bleeding time；Clotting time；Fibrinogen 􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂 [18] [19] [20] [21] [22] [23] [24] 苏新.半夏愈伤组织的诱导和植株再生的研究[J].中国中 药杂志，1989，14（11）：656. 崔晓星，李晓洋，孟繁蕴.半夏快速繁殖技术的研究进展 [J].中国农学通报， 2009，25（1）： 51. 秦瑞珍.长时期保持高频率再生能力的同源四倍体水稻 花粉无性系的建立[J].植物学报， 1989，31（11）：830. 李修庆，邓芙莲.胡萝卜人工种子的制作流程以及在有菌 土壤中的发芽成苗[M].北京：北京大学出版社，1990： 125. 孟树兰，董慧明，邓继武，等.马铃薯人工种子生产技术探 索[J].中国马铃薯， 2004，18（3）： 169. 张桂芳，黄松，刘宏源，等.铁皮石斛人工种子制作及影响 因素研究[J].中草药， 2011，42， （9）： 1 812. 张苏锋.半夏人工种子的研究[J].信阳师范学院学报：自 Δ 基金项目：重庆市教委科学技术研究项目（No.2011CJ02）；重庆 理工大学科研启动基金资助项目（No.2010ZD07） ＊副教授，博士。研究方向：中药新药研发。E-mail：zhy@cqut. edu.cn · 2884 · China Pharmacy 2013 Vol. 24 No. 31 [25] [26] [27] [28] [29] [30] [31] 然科学版， 1998， 11（3）：281. 薛建平，张爱民，盛玮，等.半夏人工种子贮藏技术的研究 [J].中国中药杂志， 2005， 30（23）： 1 820. 李西文，张晓柠，刘海涛，等.半夏有性繁殖研究[J].现代 中药研究与实践， 2006，20（5）：59. 尹翠翠，张燕，张景华，等.秋水仙素诱导杂交兰四倍体及 倍性鉴定[J].核农学报， 2010，24（3）： 518. 张合成，吕增仁.多倍体与果树多倍体育种[J].河北果树， 1990， （2）：38. 孙静贤，丁开宇，王兵益.植物多倍体研究的回顾与展望 [J].武汉植物学研究， 2005， 23（5）： 482. 申浩，吴卫，侯凯，等.不同施肥水平对川半夏产量和有效 成分的影响研究[J].中国中药杂志， 2011， 36（8）： 963. 陈铁柱，周先建，张美，等.赫章半夏 GAP 规范化种植标 准操作规程（SOP）[J].现代中药研究与实践，2011，25 （2）：8. （收稿日期： 2012-09-10 中国药房 修回日期： 2012-12-26） 2013 年第 24 卷第 31 期 见 血 青 为 兰 科 Orchidaceae 羊 耳 蒜 属 Liparis 脉 羊 耳 兰 解剖剪将距小鼠尾尖 3 mm 处横向剪断，待血液自行溢出计 Liparis nervosa（Thunb.）Lindl.的全草 ，收载于《民间常用草药 时，每 30 s 用滤纸吸去血滴 1 次，直至血液自然停止所需的时 汇编》、 《浙江民间常用草药》、 《四川常用中草药》、 《贵州药植 间即为小鼠 BT， 记录实验结果并计算缩短率。 目录》等书籍，具有凉血止血、清热解毒的功效，全草含脉羊耳 2.3 兰碱。对见血青的研究始见于 Nishikawa K 等 对脉羊耳兰 2.3.1 分组与给药 分组与给药同“2.2.1” 项下方法。 碱的化学结构进行研究，但见血青的药理学实验鲜有报道，仅 2.3.2 CT 的测定[11] [1] [2-4] 见血青提取物对小鼠 CT 的影响 采用毛细管法。小鼠于末次给药 1 h 后， 对见血青总生物碱和多糖的抑菌作用和抗氧 用内径 1 mm、长 15 cm 的玻璃毛细管插入小鼠左眼内眦球后 化性的研究。现有文献 [7-9] 报道，咖啡酸和黄酮类化合物是凉 静脉丛取血，血液注满后取出，平放于桌面每隔 30 s 折断毛细 血止血药小蓟、大蓟、大黄等的止血活性成分。为了更好地开 管两端约 0.5 cm，并缓慢左右拉开，观察折断处是否有凝血丝 发利用见血青这一民间常用中草药，本研究制备了见血青的 出现，自血液流入毛细管内开始计时，至血凝丝出现所需时间 水提取物和不同极性部位，研究其对小鼠出血时间（BT）、凝血 为该毛细管段 CT，取毛细管两端的平均值为小鼠 CT，计算缩 时间（CT）的影响及对大鼠各项血液凝集参数的影响，为进一 短率。 步阐明见血青止血作用机制提供理论依据。 2.4 1 材料 2.4.1 见于董艳芳等 1.1 [5-6] 见血青提取物对大鼠血液凝集参数的影响 分组与给药 将 100 只大鼠随机均分为 10 组，即生理 盐水组，云南白药（2 g/kg）组，见血青石油醚提取物高、低剂量 仪器 CA-510 型全自动凝血分析仪（日本希森美康株式会社）； （4、2 g/kg）组，见血青二氯甲烷提取物高、低剂量（4、2 g/kg） TDL-80-2B 型台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；AUW-220D 组，见血青水醇液提取物高、低剂量（4、2 g/kg）组与见血青水 型电