QuEChERS/液相色谱-串联质谱法测定果蔬中乙烯利残留

QuEChERS/液相色谱-串联质谱法测定果蔬中乙烯利残留内容摘要：

第 32 卷 第 10 期 2013 年 10 月 分析测试学报 FENXI CESHI XUEBAO（ Journal of Instrumental Analysis） Vol. 32 No. 10 1237 ～ 1241 QuEChEＲS / 液相色谱 － 串联质谱法测定 果蔬中乙烯利残留 * 粟有志 ，李艳美，尚 （ 伊犁出入境检验检疫局 摘 爽，雷红琴，胡建民，罗 综合技术服务中心，新疆 琼 伊宁 835000） 要： 建立了果蔬中乙烯利残留快速检测的 QuEChEＲS / 液相色谱 － 串联质谱（ HPLC － MS / MS） 方法。样品 以水提取，经 N-丙基乙二胺（ PSA） 和石墨化碳黑（ GCB） 净化后，通过色谱和质谱条件的优化，采用电喷雾电 + 离正离子模式（ ESI ） 、多反应监测（ MＲM） ，空白基质外标法定量。结果表明： 乙烯利在 0. 5 ～ 50 mg / L 范围 内，线性系数不小于 0. 995，在 5 种基质 （ 黄瓜、番茄、辣椒、苹果、香蕉） 中，3 个加标水平 （ 2. 5、5. 0、 10. 0 mg / kg） 下的回收率为 80. 5% ～ 92. 7% ，标准标准偏差为 3. 1% ～ 8. 3% 。该方法简便、快速、安全，可用 于果蔬样品中乙烯利残留的快速确证及定量分析。 关键词： QuEChEＲS； 乙烯利； HPLC － MS / MS 中图分类号： O657. 63； O629. 8 文献标识码： A 文章编号： 1004 － 4957（ 2013） 10 － 1237 － 05 doi： 10. 3969 / j. issn. 1004 － 4957. 2013. 10. 016 Determination of Ethephon Ｒesidue in Fruits and Vegetables by QuEChEＲS / High Performance Liquid Chromatography － Tandem Mass Spectrometry SU You-zhi * ，LI Yan-mei，SHANG Shuang，LEI Hong-qin，HU Jian-min，LUO Qiong （ Comprehensive Technical Service Centre of Yili Entry － Exit Inspection and Quarantine Bureau，Yining 835000，China） Abstract： A new method was developed for the detection of ethephon residue in fruits and vegetables by QuEChEＲS / high performance liquid chromatography － tandem mass spectrometry． The samples were extracted with water，and cleaned up with PSA and GCB． As the chromatography and MS conditions were optimized，the analysis of the target compound was performed under electrospray positive ion source and multiple reaction monitoring mode（ MＲM） ，and the quantitation was carried out by the external standard method with the blank matrix． The calibration curve was linear in the range of 0. 5 － 50 mg / L with a correlation coefficient not less than 0. 995． The recoveries of ethephon in cucumber，tomato，pepper，apple and banana matrices at three spiked levels of 2. 5，5. 0，10. 0 mg / kg ranged from 80. 5% to 92. 7% ，and the relative standard deviations were in the range of 3. 1% － 8. 3% ． The method is simple，fast and safety，and is suitable for the confirmation and quantification of ethephon residue in fruits and vegetables． Key words： QuEChEＲS； ethephon； HPLC － MS / MS 乙烯利又称乙烯磷，化学名为 2-氯乙基膦酸，是一种人工合成的植物生长调节激素。乙烯利可以释 放出乙烯，具有促进果实成熟、刺激伤流、调节性别转化等作用，被广泛用于苹果、番茄、香蕉等果蔬 的生产及贮藏中。过量乙烯利被食用后可加速消化道衰老，造成消化道溃疡，对大脑和肾脏也有一定的 ［1 － 4］ 、顶空气相色谱法［5 － 6］、毛细管气相色谱法［7］、液 损害。当前乙烯利的检测方法主要有离子色谱法 ［8］ 相色谱 － 串联质谱法 ，但离子色谱法和气相色谱法均为半定性分析，不能对乙烯利残留进行确证分析。 QuEChEＲS 前处理技术以快速、简单、 廉价、 高效、 耐用、 安全著称， 已广泛用于农药残留的检 ［9 － 18］ ，可有效提高农药残留分析的前处理效率。 本文利用 QuEChEＲS 方法前处理， 并结合液相色 谱 － 串联质谱仪（ LC － MS / MS） 开展果蔬中乙烯利残留的研究， 建立了果蔬中乙烯利检测的快速确证 测 方法。 收稿日期： 2013 － 05 － 24； 修回日期： 2013 － 06 － 07 基金项目： 国家质检总局行业标准制修订计划项目（ 2012B388） * 通讯作者： 粟有志，硕士，工程师，研究方向： 农兽药残留分析，Tel： 0999 － 8321447，E － mail： suyouzhi1110@ 163. com 分析测试学报 1238 1 第 32 卷 实验部分 仪器与试剂 1. 1 1260 － 6460A 高效液相色谱 － 串联质谱仪 （ 美国 Agilent 公司 ） ； Sigma3 － 18K 台式冷冻离心机 （ 德 国 Sigma 公司） ； EYELA MMV － 1000W 振荡器 （ 日本东京理化公司 ） ； GM200 刀式混合研磨仪 （ 德国 Ｒetsch 公司） ； Milli-Q Advangtage A10 超纯水系统（ 美国 Millipore 公司） ； MS3 型涡旋振荡器 （ 德国 IKA 公司） 。 乙烯利标准品（ 纯度 99% ，德国 Dr. Ehrenstorfer 公司） ； 甲醇、乙腈（ HPLC 级， 德国 Merck 公司 ） ； N-丙基乙二胺（ PSA） 及石墨化碳黑 （ 美国 Agilent 公司 ） 。 实验用水均为经 Milli-Q 超纯水器纯化的超纯 水。果蔬为实验室送检样品。 标准储备液的配制与基质加标工作曲线的制作 1. 2 乙烯利标准品储备液的配制： 称取标准品 10 mg（ 精确至 0. 01 mg） 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇溶解 并定容至刻度，配成质量浓度为 1 000 mg / L 的标准储备液，储存于 4 ℃ 冰箱中备用。 基质匹配标准溶液： 称取 10 g（ 精确至 0. 01 g） 空白样品于 50 mL 具塞离心管中，按 “1. 3” 所述进 行样品提取、净化， 获得空白基质提取液， 逐步用空白基质提取液将标准储备液稀释至 0. 5、1、2、 5、10、20、50 mg / L。 QuEChEＲS 前处理 1. 3 取果蔬可食部分切碎混匀，粉碎成匀浆备用； 称取样品 10 g（ 精确至 0. 01 g） 于 50 mL 具塞离心管 中， 准确加入 15. 0 mL 水，涡旋 30 s，置入振荡器水平振摇 15 min，以转速为 10 000 r / min 离心 5 min； 将离心管中全部提取液倒入装有滤纸的布氏漏斗中 ， 抽滤； 收集全部滤液定容至 25. 0 mL； 吸取定容 后的提取液 1. 5 mL 置于 2 mL 塑料离心管，加入 10 mg GCB 和 50 mg PSA，涡旋 30 s，12 000 r / min 离 心 10 min，取上清液过 0. 22 μm 尼龙膜，滤液待测。 仪器条件 1. 4 液相色谱条件 色谱柱： Agilent Zorbax SB － Aq 柱（ 30 mm × 100 mm，1. 8 μm） ； 柱温为 40 ℃ ； 进样量为 5 μL； 流动相为甲醇 － 0. 1% 甲酸水溶液 （ 10 ∶ 90， 体积比 ） ， 流速为 0. 2 mL / min， 等梯度 1. 4. 1 洗脱。 1. 4. 2 质谱条件 电离模式： 电喷雾正离子源模式 （ ESI + ） ； 多反应监测 （ MＲM） ； 干燥气温度： 350 ℃ ； 干燥气流量： 9. 0 L / min； 毛细管电压： 4 kV； 鞘气温度： 250 ℃ ； 鞘气流速： 11. 0 L / min； 碎裂 电压： 120 V； 驻留时间： 50 ms； 监测离子对分别为 m / z 145 ＞ 81、m / z 145 ＞ 109； 两者的碰撞能量分 别为 12 eV 和 24 eV，其中 m / z 145 ＞ 81 为定量离子。 2 2. 1 结果与讨论 质谱条件的优化 对 100 mg / L 的乙烯利标准溶液在不接色谱柱的 + 条件下，分别用电喷雾电离正离子模式 （ ESI ） 和电 － 喷雾电离负离子模式 （ ESI ） 进行母离子全扫描， 确 + 定乙烯利正离子模式的［M + H］ 为 m / z 145， 负离子 － 模式下的［M － H］ 为 m / z 143。利用安捷伦 Optimizer 软件对两种模式下的子离子、 碎裂电压、 碰撞能量等 参数进 行 优 化。 优 化 结 果 表 明： 负 模 式 条 件 下 m / z 143 ＞ 79、m / z 143 ＞ 107 两个离子对信号最强， 结果