中华鳖性腺的发生与发育研究

中华鳖性腺的发生与发育研究内容摘要：

第 33卷 第 5期 水 生 生 物 学 报 Vol1 33, No1 5 2 0 0 9年 9月 ACTA H YDROBIOLOG ICA SIN ICA Sep1, 2 0 0 9 DO I号: 1013724 /SP1J1000012009150924 中华鳖性腺的发生与发育研究 朱道玉 (菏泽学院动物生物学重点实验室, 菏泽 274015) 摘要: 为了揭示中华鳖性腺的发生与发育 规律, 在 ( 32 ? 01 5) e 温度下孵化鳖卵, 72h时, 从组织切 片中可见原 始生 殖细胞移向中肠附近的内胚层; 第 5天生殖嵴形成 ; 第 13天性腺分化 为皮质和髓 质; 第 16天性腺 开始分化为 精巢 或卵巢, 至第 22天时分化 结束, 形成精巢或卵巢。胚胎期、稚鳖和 1龄鳖的性 腺均呈短 细管状, 表面光滑, 无色, 胶 状透明; 2龄、3龄、4龄鳖的精巢呈长椭圆形。稚鳖的卵巢发育至卵原细胞期, 组成精巢的曲细精管不 明显, 管 内为 精原细胞; 1龄幼鳖的卵巢发育至初级卵泡期, 精巢的曲细 精管内 精原细 胞的数 量增加; 2龄和 3龄鳖 的卵巢 处于 生长卵泡期, 3龄末的卵巢内可见到成熟卵泡, 2龄鳖的曲细精管内出现初级精 母细胞, 3龄末的曲细精管开始 出现 精细胞和精子; 4龄鳖的卵巢发育至成熟卵泡期, 曲细精管内由管壁向管腔依次为精原细胞、初级精母细胞、 次 级精 母细胞、 精细胞和精子。结果表明, 在 ( 32 ? 015) e 温度下, 鳖胚发育至 22d时, 精巢 或卵巢形成; 在自 然条件下, 中 华鳖至 4龄时, 性腺才完全发育成熟。 关键词: 中华鳖; 生殖腺; 发育; 形态学; 组织学 中图分类号: Q174 文 献标识码: A 文章编号: 100023207( 2009) 0520924207 中华鳖 (Trionyx sinensis) (以下简称鳖 )隶属脊 椎动物亚门 ( Vertebrata)、爬行纲 ( Reptilia)、龟鳖目 7d的雌、雄稚鳖各 4只。 112 鳖卵的孵化 取鳖受精卵 400枚, 恒温箱内孵 新疆、 西藏和青海外的其他各省, 是我国养殖最广泛 化, 孵化基质为粗砂、中砂和细砂, 体积比为 1B4B1, 孵化基质温度为 ( 32 ? 015) e , 湿度为 7% ) 8% , 相 的水生爬行动物, 具有重要的经济和药用价值。关 对湿度为 75% ) 80% 。 ( Chelonia)、鳖科 ( Trionychidae), 广泛分布于我国除 [ 1] [ 2] 于爬行动物的胚胎发育, K aska 、A ckerman 对海 龟 ( Chelonia myda s), 侯 陵 安 [ 5] 、谭立军 [ 6] [ 3] 、刘 筠 [ 4] 对 鳖, 刘 国 对乌龟 ( Chinemys reevesii )有过报道。 关于鳖性腺发育的研究, 国内外仅见章龙珍 [ 7] 对出 壳稚鳖经恒温 (水温 31e ? 015e )养殖 10个月鳖 性腺发育、 刘筠 [ 8] 对 15日龄至 6冬龄鳖性腺发育的 研究报道。本实验对鳖胚胎期性腺的发生、分化及 形态学和组织学特征, 以及稚鳖和 1龄、2龄、3龄、4 龄鳖性腺发育的形态学、 组织学特征进行全面、 系统 113 性腺的 解剖 与测 量 取 孵化 16) 34d 的胚 体, 每天解剖 4只。取出壳 7d及 1龄、2龄雌、雄鳖 各 4只, 解剖, 在 MoticSMZ2168 生物体视数码显微 成像系统下对性腺进行测量和拍照; 解剖 3龄、4龄 雌、 雄鳖各 4只, 数码相机对性腺拍照, 游标卡尺测 量性腺的大小和卵径; 性腺及鳖的质量用电子天平 测量。 114 生殖腺和胚胎的组 织切片 孵 化 1) 16d的 胚胎, 17d及以后各期胚胎的性腺, 出壳 7d及 1、2、 的研究, 这在国内外尚未见报道, 现报道结果如下。 3、4龄鳖的性腺用 Bou in s. 液固定, 梯度酒精脱水, 石蜡包埋, 切片, H 1E 染色, M oticDMB522231 数码 1 材料与方法 显微成像系统对其观察和拍照。 111 实验材料 雌性和雄性 1龄、2龄、3龄鳖各 4 只 (均为越冬 前的鳖 ), 孵化用卵 (受精卵 ) 400 枚, 均为菏泽黄河甲鱼养殖场提供; 本实验室孵化出壳 2 结 果 211 胚胎期性腺的形态大小 自卵孵化至第 16天起, 实体生物显微镜下可观 收稿日期: 2009204213; 修订日期: 2009206215 基金项目: 山东省科技厅发展计划项目 ( No1 2007GG20009021)资助 作者简介: 朱道玉 ( 1962) ), 男, 汉族, 山东郓城人; 副教授; 研究方向为发育生物学。 E2m ai:l daoyuzh@ sin a1 com 5期 925 朱道玉: 中华鳖性腺的发生与发育研究 察到最初的生殖腺, 位于腹腔后部脊柱两旁, 肾脏的 腹方前外侧, 肠道的背方, 呈短细管状, 表面光滑, 无 巢的质量和大小分别为 ( 165175 ? 7172) g、( 2178 ? 0138) g和 ( 4519 ? 4108) mm @( 4110 ? 0147) mm; 色胶状透明。外形上早期的精巢和卵巢无区别, 随 肉眼观察可见卵泡, 圆形、 无色、胶状、透明, 少数卵 着胚胎的逐步发育, 生殖导管在实体显微镜下清晰 泡开始变成淡黄色。 可辨, 精巢向后由附睾延伸形成的输精管直接相连, 输卵管在卵巢的外侧呈细管状且明显。第 16天 (图 3龄幼 鳖 的卵 巢 4 只 雌幼 鳖 的 质 量为 ( 331175 ? 39137) g; 解剖, 可见卵巢内大、中、小三 版Ñ21)、20d、28d、34d胚胎期生殖腺 (每组 4只的平均 种发育不等的卵泡, 少数卵母细胞进入成熟期, 最大 值 )的大小分 别为 0164 mm @0122 mm、0183 mm @ 0127 mm、1100 mm @0129 mm、1121 mm @0132 mm。 卵泡的直径达 7157 mm, 卵泡呈黄色, 成熟的卵泡从 卵巢表面隆出, 形成卵泡 囊, 卵泡囊 表面布满毛细 212 卵巢的形态大小 血管。 稚鳖的卵巢 孵化出壳 7d的雌性稚鳖 4只, 质 4龄鳖 的 卵巢 4 只 成 鳖的 质 量 分 别为 量为 ( 3162 ? 0140) g; 解剖后 卵巢隐约 可辨, 但在 MoticSMZ2168生物体视数 码显微镜 下卵巢清 晰可 ( 589125 ? 111155) g; 解 剖可见, 卵 巢发育 至成熟 期, 卵泡充满卵巢 (图版 Ñ23 ), 成熟 卵泡黄色位于 见 (图版 Ñ22), 位 于腹腔后部脊柱 两旁, 肾 脏的腹 卵泡囊内, 卵泡囊表面密布毛细血管; 卵泡直径大小 方前外侧, 与橘黄色的肾上腺相邻, 呈短细管状, 一 侧卵巢大小为 ( 1137 ? 0114) mm @( 0151 ? 0107) 不等, 小的 1100 mm, 最大达 14140 mm, 1对卵巢内 卵径大于 5 mm的卵泡有的多达 70个。 mm, 无色透明, 表面光滑, 靠系膜联于体腔背侧。输 213 精巢的形态大小 精巢位置同卵巢; 解剖出壳 7d稚鳖, 实体显微 卵管在卵巢的外侧, 明显可见。 1龄幼鳖的卵巢 4只幼鳖的质量及相应同侧 卵巢的质量和大小分别为 ( 36117 ? 5192) g、( 01058 镜下稚鳖、1龄幼鳖的精巢呈短管状, 光滑, 胶状, 无 色透明, 输精管联于精巢的后方 (图版 Ñ24); 2龄、3 ? 01005) g和 ( 7160 ? 0195) mm @( 2194 ? 0145) 龄和 4龄鳖的精 巢均呈长椭圆 形, 乳白色, 大小有 mm; 卵巢的解剖位置同稚鳖; 但卵巢肉眼可辨; 解剖 镜下可观察到无色、 胶状、 透明的卵泡。 别, 切开 3龄末和 4龄 精巢可见白色的 精液流出。 各期鳖精巢的质量、大小见表 1 (因稚鳖 的精巢较 2龄幼鳖的卵巢 4只幼鳖的质量, 相应同侧卵 小, 难以解剖, 故未能称重 )。 表 1 不同年龄鳖精巢的质量、大小 Tab1 1 The quality and s ize of test is in differen t age tu rt le 鳖龄 体重 精巢重 生殖腺指数 精巢大小 (长径 @短径 mm ) Turtle age Body weight ( g) Tes tis weight ( g) GSI (% ) Testis size ( long d iam eter @ short d iameter) 7d 21 61 ? 0153 ( 1121 ? 01 16) @( 01 37 ? 0105 ) 1龄 311 43 ? 141 21 0110 ? 01 05 01 31 ? 0101 ( 12121 ? 41 25) @( 31 37 ? 0170 ) 2龄 2731 60 ? 141 29 1100 ? 01 06 01 36 ? 0102 ( 25140 ? 11 00) @( 91 09 ? 0120 ) 3龄 3171 40 ? 171 8 1162 ? 01 27 01 51 ? 0107 ( 27136 ? 01 85) @( 101 33 ? 01 14 ) 4龄 7291 50 ? 321 36 7128 ? 01 44 11 00 ? 0102 ( 38176 ? 31 36) @( 151 71 ? 21 00 ) 214 卵泡的发育 Ñ25)。 稚鳖的卵泡 卵巢内由结缔组织纤维、 毛细血 管和生殖上皮形成的卵巢膜和基质组成, 并把卵巢 1龄幼鳖的卵泡 1 龄幼鳖卵巢的发育处于初 级卵泡期, 卵巢内有发育的初级卵泡。卵泡内的初 分成一个个小室, 是原始卵泡在此 生长、发 育的场 级卵 母细 胞 圆形 或 稍椭 圆 形, 体 积较 大, 卵 径约 所。在卵巢腔内, 可 见卵 原细 胞和 由卵 原细 胞 向 初级卵泡过渡的卵泡。卵原细胞直径约 14 Lm, 中 166) 210 Lm, 外被一层滤泡细胞和一层营养细胞; 卵核大而圆形, 染色质开始分散呈空泡状, 核仁大而 央有 1 个 大的 细胞 核, 细 胞 质 少, 外 周无 滤 泡 细 明显 4) 6个, 初级卵母细胞内由于空泡的出现, 卵 胞; 早期的 初级 卵泡, 直径