微生物学实验技术
微生物学实验技术内容摘要：
２１ 世纪生物学基础课系列实验教材 微生物学实验技术 刘国生 主编 北 京 内 容 简 介 针对当前实验学科教学改革发展的需求 ，加强学生动手能力 、自主分析 问题与解决问题的能力 ，本书从实验内容的更新 ，实验安排的系统性及与理 论课教学的同步性等方面进行了安排 。 全书共分四部分 ：第一部分 ，微生物 学实验注意事项以及微生物学实验室常用实验设备 、仪器及物品 。 第二部 分 ，基础性验证实验 。 第三部分 ，综合性实验 。 第四部分 ，设计创新性实验 。 本书内容全面 、系统 ，图文并茂 ，兼顾理论性 、科学性 、系统性和实用 性 。 书后附有教学常用菌种 ，染色液 、培养基 、消毒液 、缓冲液 、试剂 、指示 剂等配制方法及主要参考书目 。 可供大专院校生物系 、微生物学系 、医学 专业 、环保专业等枟微生物学枠实验课教材 ，也可作为从事各行业微生物科 研 、生产等专业技术人员的参考书和工具书 。 图书在版编目（ＣＩＰ）数据 微生物学实验技术 ／刘国生主编 ．— 北京 ：科学出版社 ， ２００７ （２１ 世纪生物学基础课系列实验教材） ＩＳＢＮ ９７８唱７唱０３唱０２０２８９唱５ Ⅰ ．普 … Ⅱ ．刘 … Ⅲ ．微生物学 实验 高等学校 教材 Ⅳ ．Ｑ９３唱３３ 中国版本图书馆 ＣＩＰ 数据核字（２００７）第 １５５３０７ 号 责任编辑 ：陈 露 谭宏宇 ／责任校对 ：连秉亮 责任印制 ：刘 学 ／封面设计 ：耕者设计工作室 出版 北 京东黄 城根 北街 １６ 号 邮政编 码 ：１００７１７ ｈｔ ｔｐ ：／／ｗ ｗ ｗ ．ｓｃｉｅｎｃｅｐ ．ｃｏｍ 江苏省句容市排印厂印刷 南京理工出版信息技术有限公司照排 科学出版社发行 各地新华书店经销 倡 ２００７ 年 １０ 月第 一 版 开本 ：Ｂ５（７２０ × １０００ ） ２００７ 年 １０ 月第一次印刷 印张 ：１７ １ ／２ 印数 ：１ — ３ ２００ 字数 ：３３８ ０００ 定价 ：２８ ．００ 元 枟微生物学实验技术枠编写人员 主 编 刘国生 副主编 李学梅 王振宇 编 者 （以作者姓氏笔画为序 ） 王红星 王海磊 王振宇 刘国生 李学梅 陈建军 张 昊 张建新 赵更峰 褚学英 前 言 微生物学实验是微生物学教学的重要环节 。 实验课质量的好坏 ，直接关系到 学生的学习质量和兴趣 。 学习和掌握微生物学实验的基本方法和研究技术 ，必将 加深学生对微生物学基本理论的理解 ，并促进微生物学在工业 、农业和医药卫生等 方面的应用研究 。 为了配合微生物学教学 ，按照枟微生物学教学大纲枠 ，并根据多年 来从事微生物学教学和科研的实践经验 ，编写了这本枟微生物学实验技术枠 。 按照微生物学实验技术的知识结构层次 ，考虑到学生实验操作的阶段性与递 进性 ，突出学生自主思考与动手能力的培养 ，全书共安排四个部分的实验内容 ：第 一部分简要介绍了微生物学实验注意事项以及微生物学实验室常用实验设备 、仪 器及物品 。 第二部分是基础性实验 ，包括显微镜技术 ，微生物染色与形态结构观 察 ，培养基的配制 、灭菌与除菌 ，微生物接种与培养 ，微生物的分离与纯化 ，微生物 数量的测定 ，环境因素对微生物的影响 ，微生物的生理生化反应 ，微生物的遗传与 育种 ，微生物菌种保藏 ，免疫学技术及环境微生物的检测等内容 。 第三部分是综合 性实验 ，这部分内容是在验证性实验开设的基础上 ，学生具备了微生物学实验的基 本操作技能 ，有选择地开设有一定难度的综合性实验 ，以培养学生利用不同章节甚 至不同学科的理论知识 ，综合训练学生多种实验的操作技能 ，本部分共有 １０ 个实验 。 第四部分是设计创新性实验 ，选择一些与研究 、生产 、生活密切相关的实验内容 ，重点 培养学生在实验设计 、实验准备 、独立操作 、相互协作及分析和解决问题的能力 。 此外 ，在第四部分之后的附录部分 ，包括教学常用菌种以及染色液 、培养基 、消 毒液和缓冲液等的配制方法 ，可作为实验教学过程的重要参考资料 。 枟微生物学实验技术枠着重于微生物学的基本操作和技能训练 。 本书所列的实 验内容绝大部分都是作者在长期从事微生物学教学和科研中应用过的 ，方法较为 准确 。 为了方便教学 ，每一个实验一般都按实验目的 、实验原理 、实验器材 、实验步 骤 、注意事项 、实验记录和思考题七个部分编写 。 实验记录尽量采用图表形式 ，便 于学生填写实验结果 。 本书在编写过程中 ，全体编写人员反复讨论 ，多次修改 。 其中 ，第一部分由张 昊编写 ，第二部分由刘国生 、王振宇 、王海磊 、陈建军 、赵更峰编写 ，第三 、四部分及 附录部分由褚学英 、王红星编写 ，书中插图由刘国生 、张建新绘制 ；此外 ，冉治霖 、刘 娜娜 、王艳芬 、赵婷参与了文稿的校对工作 ；最后由刘国生 、李学梅 、王振宇统稿 。 本书的出版承蒙各方面的大力支持 ，在此 ，谨向关心 、支持本书编写工作的专家同 行 ，向编写过程中所选用资料的原作（著）者 ，表示诚挚的谢意 ！ 由于编者水平所限 ，加上编写时间仓促 ，书中错误和不足之处在所难免 ，诚恳 希望读者批评指正 。 目 录 Ｃｏｎｔｅｎｔｓ 前言 第一部分 微生物学实验注意事项及实验室的设备 １ 一 、微生物学实验注意事项 １ 二 、实验室的设置和主要设备 ２ 三 、实验室常用的器皿及清洗方法 ７ 第二部分 基础性实验 １４ 第一章 显微镜技术 １４ 实验一 普通光学显微镜 １４ 实验二 暗视野显微镜 ２２ 实验三 相差显微镜 ２４ 实验四 荧光显微镜 ２７ 实验五 电子显微镜 ２９ 第二章 微生物的染色与形态结构观察 ３６ 实验六 细菌运动性的观察 ４１ 实验七 细菌的单染色法 ４３ 实验八 细菌的革兰氏染色法 ４４ 实验九 细菌的芽孢染色法 ４７ 实验十 细菌的荚膜染色法 ４８ 实验十一 细菌的鞭毛染色法 ５０ 实验十二 细菌的抗酸性染色法 ５２ 实验十三 细菌的荧光染色法 ５３ 实验十四 细胞核的染色 ５４ 实验十五 放线菌的形态观察 ５６ 实验十六 酵母菌水浸片的制备及死 、活细胞鉴别 ５７ ｖｉ 〞▽ 世 纪 生 物 学 基 础 课 系 列 实 验 教 材 微生物学实验技术 实验十七 霉菌的形态观察 ５８ 实验十八 微生物大小的测定 ６０ 第三章 培养基的配制 ６４ 实验十九 牛肉膏蛋白胨培养基的制备 ７２ 实验二十 马铃薯培养基的制备 ７４ 实验二十一 高氏 １ 号培养基的制备 ７５ 实验二十二 伊红美蓝培养基的制备 ７６ 第四章 灭菌与除菌 ７７ 实验二十三 干热灭菌 ８２ 实验二十四 高压蒸汽灭菌 ８４ 实验二十五 紫外线灭菌 ８７ 实验二十六 过滤除菌 ８９ 第五章 微生物接种与培养 ９０ 实验二十七 酵母菌子囊孢子的生成及观察 １０１ 实验二十八 根霉接合孢子的形成与观察 １０３ 实验二十九 厌氧微生物的培养 １０５ 第六章 微生物的分离与纯化 １０７ 实验三十 从土壤中分离纯化固氮菌 １１３ 实验三十一 从土壤中分离纯化放线菌 １１４ 实验三十二 根瘤菌的分离 １１６ 实验三十三 乳酸菌的分离 １１８ 实验三十四 噬菌体的分离与纯化 １１９ 第七章 微生物数量的测定 １２１ 实验三十五 显微镜直接计数法 １２２ 实验三十六 平板菌落计数法 １２５ 实验三十七 噬菌体效价的测定 １２７ 实验三十八 细菌生长曲线的测定 １３０ 第八章 环境因素对微生物的影响 １３２ 实验三十九 物理因素对微生物的影响 １３２ 实验四十 化学因素对微生物的影响 １３５ 实验四十一 生物因素对微生物的影响 １３９ 第九章 微生物的生理生化 １４１ 实验四十二 大分子物质的水解实验 １４１ 目 录 实验四十三 糖发酵实验 实验四十四 ＩＭ ＶｉＣ 和硫化氢实验 ｖｉｉ １４４ １４６ 实验四十五 抗生素效价的生物测定 １５０ 实验四十六 动力实验 １５３ 实验四十七 细菌酶活性测定实验 第十章 微生物遗传与育种 １５５ 悙 １５７ 实验四十八 理化因素的诱变效应 １５７ 实验四十九 营养缺陷型突变株的筛选 １６２ 实验五十 细菌的转化实验 １６６ 实验五十一 细菌的接合作用 １６９ 实验五十二 细菌的原生质体融合 １７２ 第十一章 微生物菌种保藏 １７６ 实验五十三 简易常用微生物菌种保藏方法 １７６ 实验五十四 冷冻真空干燥保藏法 １７９ 实验五十五 液氮冷冻保藏法 １８３ 第十二章 免疫学实验技术 １８５ 实验五十六 抗原和免疫血清的制备 １８５ 实验五十七 凝集反应和沉淀反应 １８８ 实验五十八 双向琼脂扩散实验 １９２ 实验五十九 琼脂免疫电泳 １９４ 第三部分 综合性实验 １９８ 实验六十 霉菌和放线菌的接种 、培养及形态观察 １９８ 实验六十一 用生长谱法测定微生物的营养要求 ２０１ 实验六十二 微生物细胞的固定化 ２０３ 实验六十三 食用菌母种 、原种 、栽培种的制备 ２０４ 实验六十四 平菇的代料栽培 ２０６ 实验六十五 小型发酵罐的使用与发酵过程中主要 生化指标测定 ２０８ 实验六十六 水的细菌学检测 ２１１ 实验六十七 空气中微生物的检测 ２１６ 实验六十八 四大类微生物菌落特征的比较与识别 ２１８ 实验六十九 ＳＢＲ 活性污泥法处理啤酒废水 ２２２ 〞▽ 世 纪 生 物 学 基 础 课 系 列 实 验 教 材 微生物学实验技术 ｖｉｉｉ 第四部分 设计性实验 〞▽ 世 纪 生 物 学 基 础 课 系 列 实 验 教 材 ２２６ 实验七十 城市空气中微生物调查 ２２６ 实验七十一 肌苷发酵过程中还原糖的测定 ２２８ 实验七十
